MRD技術(shù)流派之爭(zhēng)：5個(gè)維度告訴你誰(shuí)是最優(yōu)解

盡管MRD檢測(cè)在國(guó)內(nèi)尚屬新興領(lǐng)域，但業(yè)內(nèi)和臨床界對(duì)此頗為關(guān)注，廣泛討論。

核心在于，已經(jīng)有越來(lái)越多研究證明了MRD預(yù)后的重要意義價(jià)值。所謂MRD，即微小殘留病灶，指癌癥患者接受治療后殘留的腫瘤細(xì)胞，含量或許微乎其微，但仍可能會(huì)引起患者癌癥復(fù)發(fā)。

全球范圍內(nèi)，血液瘤患者治療后需要監(jiān)控MRD，早已是共識(shí)；實(shí)體瘤MRD檢測(cè)的臨床研究，同樣熱火朝天。國(guó)內(nèi)也正迎頭追趕。

4月23日，泛生子攜手復(fù)星醫(yī)藥舉辦2022首屆血液腫瘤MRD高峰論壇，包括蘇州大學(xué)第一附屬醫(yī)院吳德沛教授、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院邱錄貴教授等20余位頂級(jí)學(xué)術(shù)大咖參與，吸引了業(yè)內(nèi)極高的關(guān)注度。國(guó)內(nèi)首個(gè)針對(duì)血液腫瘤MRD內(nèi)容的學(xué)術(shù)交流平臺(tái)也在此次論壇上應(yīng)運(yùn)而生。

潛在的旺盛需求，也吸引了眾多藥企入局，使得MRD檢測(cè)技術(shù)發(fā)展迅猛，流派眾多。任何市場(chǎng)都會(huì)優(yōu)勝劣汰，目前看只剩下兩大主流門派：流式細(xì)胞術(shù)和二代測(cè)序（NGS）。

任何時(shí)候，可靠的檢測(cè)技術(shù)獲得的MRD都是預(yù)后管理的重要指標(biāo)。那么，在患者的預(yù)后管理中，該用流式細(xì)胞術(shù)還是NGS-MRD？不少國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)專家、學(xué)者都為此感到疑惑甚至有所爭(zhēng)論，更不用說投資者了。

那么，未來(lái)誰(shuí)才是主流呢？讓我們從敏感度、克隆異質(zhì)性、可及性、樣本要求以及成本這幾大維度來(lái)一探究竟。

1、敏感度

MRD檢測(cè)產(chǎn)品最重要的自然是檢測(cè)能力，對(duì)應(yīng)的指標(biāo)是敏感度。這一點(diǎn)，NGS-MRD具有潛在優(yōu)勢(shì)是無(wú)可爭(zhēng)議的。

因?yàn)?，出生決定命運(yùn)。

具體來(lái)看，流式細(xì)胞術(shù)主要通過“外在”識(shí)別腫瘤細(xì)胞。其原理是通過正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞表面抗原的差異進(jìn)行篩選，簡(jiǎn)單理解就是“找不同點(diǎn)”。

但腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞抗原的差異點(diǎn)實(shí)則很少。既要發(fā)現(xiàn)更多的不同點(diǎn)，還要能夠通過相應(yīng)的方法檢測(cè)出來(lái)，是一個(gè)極為困難的事情。

所以，流式細(xì)胞術(shù)敏感度的提升，也非常不容易。目前國(guó)內(nèi)應(yīng)用最廣泛的常規(guī)流式細(xì)胞術(shù)，檢測(cè)范圍只有10^-4；最先進(jìn)的二代流式細(xì)胞術(shù)NGF，檢測(cè)范圍大概是10^-5和10^-6，檢測(cè)上限是：在100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中，找出1個(gè)腫瘤細(xì)胞。這已然很不錯(cuò)。

與流式細(xì)胞術(shù)相反，NGS-MRD則是通過“內(nèi)里”去識(shí)別腫瘤細(xì)胞。大家都知道，腫瘤的發(fā)生，主要因?yàn)榛驅(qū)用娣肿赢惓?如融合、突變、重排)等導(dǎo)致的。例如，淋巴細(xì)胞的基本特征之一是T細(xì)胞中TCR基因和B細(xì)胞中Ig基因的重排。

NGS-MRD便是通過檢測(cè)基因片段的方式，去識(shí)別、追蹤腫瘤細(xì)胞。從技術(shù)角度來(lái)說，NGS-MRD的“打擊”更加精準(zhǔn)，遺漏的概率更小，敏感度自然也就更高。

目前，國(guó)際上最先進(jìn)的NGS-MRD的檢測(cè)范圍可以達(dá)到10^-5和10^-7。也就是說，NGS-MRD的上限理論上可以達(dá)到NGF的10倍左右。

實(shí)際上，在樣本量充足的情況下，NGS-MRD玩家的“下限”基本已能達(dá)到10^-6。比如，海外巨頭adaptive公司的cloneSEQ，以及國(guó)內(nèi)玩家泛生子的Seq-MRD、泛因醫(yī)學(xué)的NEO-MRD，都是如此。

性能優(yōu)于流式細(xì)胞術(shù)，NGS-MRD產(chǎn)品給患者帶來(lái)更大臨床獲益的可能性也越大。

這一點(diǎn)，也得到了臨床專家的肯定。在2022首屆血液腫瘤MRD高峰論壇上，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院糜堅(jiān)青教授表示，從一些臨床研究來(lái)看，不管是移植前還是移植后，NGS-MRD產(chǎn)品都能比流式細(xì)胞術(shù)更好的預(yù)測(cè)患者的復(fù)發(fā)情況。

也正因此，adaptive公司的cloneSEQ推出后，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于各項(xiàng)研究和實(shí)際應(yīng)用。而在國(guó)內(nèi)，隨著泛生子等玩家填補(bǔ)空白后，熱度也開始高漲。

從敏感度來(lái)看，未來(lái)走得更遠(yuǎn)的，大概率會(huì)是NGS-MRD產(chǎn)品。

華中科技大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院孫春艷教授在2022首屆血液腫瘤MRD高峰論壇便表示，未來(lái)MRD陰性的標(biāo)準(zhǔn)，可能會(huì)提高到10^-6以上。這一標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于二代流式細(xì)胞術(shù)也存在較大的挑戰(zhàn)，但這僅是NGS-MRD的“下限”。

2、克隆異質(zhì)性

所謂克隆異質(zhì)性，是指在腫瘤演變過程中，腫瘤細(xì)胞“內(nèi)在”的差異。

由于腫瘤細(xì)胞的突變基因譜和生物學(xué)特性，本身就是高度復(fù)雜和極其多樣性的。同一惡性腫瘤在不同患者，或同一患者不同部位，從基因型到表型都會(huì)有差異。

而在腫瘤演變過程中，遺傳是非常不穩(wěn)定的。正如達(dá)爾文所講的優(yōu)勝劣汰一樣，腫瘤細(xì)胞也會(huì)逐漸產(chǎn)生更適應(yīng)其生存的亞群。這也是日常腫瘤治療過程中，復(fù)發(fā)和耐藥性的由來(lái)。

多發(fā)性骨髓瘤便是典型。邱錄貴教授曾表示，診斷時(shí)平均有50-60種基因突變，復(fù)發(fā)進(jìn)展或難治時(shí)平均近200種基因突變。

邱錄貴教授認(rèn)為，患者復(fù)發(fā)進(jìn)展后，應(yīng)再次進(jìn)行克隆結(jié)構(gòu)分析，明確是否發(fā)生克隆演變以及是哪種方式演變，將可以指導(dǎo)治療方案選擇。

原因在于，在治療手段較多的當(dāng)下，明確是否發(fā)生克隆演變，對(duì)于患者來(lái)說是一件受益明顯的事情。若未發(fā)生克隆演變，那意味著原治療方案可能還會(huì)有效；而如果發(fā)生克隆演變，這個(gè)時(shí)候就需要考慮選用不同作用機(jī)制藥物，才可能取得更長(zhǎng)時(shí)間生存。

換句話說，對(duì)于一款MRD檢測(cè)產(chǎn)品來(lái)說，能否做到識(shí)別克隆異質(zhì)性是非常關(guān)鍵的。流式細(xì)胞術(shù)基于抗原的識(shí)別能力有限，而NGS-MRD是通過識(shí)別基因序列做判斷，因此識(shí)別克隆異質(zhì)性的能力更強(qiáng)。

從這一點(diǎn)來(lái)看，兩者的應(yīng)用場(chǎng)景范圍也會(huì)有一定差異。

3、可及性

一款優(yōu)秀的醫(yī)療產(chǎn)品，除了性能必須優(yōu)秀，可及性也非常重要，即“多少患者”可以使用。那么，在可及性方面，誰(shuí)更有優(yōu)勢(shì)呢？

在回答這個(gè)問題之前，我們首先要對(duì)MRD檢測(cè)產(chǎn)品分門別類。實(shí)際上，我們現(xiàn)在提到的MRD檢測(cè)，一般默認(rèn)為血液瘤領(lǐng)域。因?yàn)镸RD檢測(cè)理念，最初是在血液瘤領(lǐng)域提出的。

但隨著技術(shù)的進(jìn)步，實(shí)體瘤的MRD檢測(cè)也在逐漸興起。海外玩家中，Adaptive在血液瘤拔得頭籌后，Guardant Health的實(shí)體瘤MRD檢測(cè)產(chǎn)品已經(jīng)獲批；而包括GRAIL在內(nèi)的基因檢測(cè)明星玩家，也正發(fā)力實(shí)體瘤的MRD檢測(cè)。

國(guó)內(nèi)玩家也沒有落后太多。去年11月，泛生子便與阿斯利康聯(lián)合開發(fā)針對(duì)中國(guó)實(shí)體瘤患者的個(gè)性化定制MRD檢測(cè)產(chǎn)品。

基于泛生子原研技術(shù)Mutation Capsule和阿斯利康的臨床數(shù)據(jù)，目前雙方進(jìn)展順利。根據(jù)泛生子發(fā)表于《血液與腫瘤學(xué)雜志》的性能驗(yàn)證結(jié)果：

該產(chǎn)品在胃癌患者的腹腔灌洗液樣本中，可檢出低至0.001%含量的腫瘤DNA，精準(zhǔn)預(yù)測(cè)腹膜擴(kuò)散。

以上，可以確定的是：未來(lái)MRD檢測(cè)并不會(huì)局限在血液瘤領(lǐng)域，更會(huì)在實(shí)體瘤領(lǐng)域大展拳腳。實(shí)際上，去年我國(guó)就已發(fā)布了首個(gè)實(shí)體瘤MRD檢測(cè)產(chǎn)品的專家共識(shí)——《肺癌MRD的檢測(cè)和臨床應(yīng)用共識(shí)》。

說回MRD檢測(cè)產(chǎn)品的可及性。之所以要對(duì)產(chǎn)品分門別類，是因?yàn)?strong>不同技術(shù)在血液腫瘤和實(shí)體瘤領(lǐng)域，能夠發(fā)揮的作用存在顯著差異，這會(huì)導(dǎo)致可及性不同。

在血液瘤領(lǐng)域，流式細(xì)胞術(shù)產(chǎn)品的可及性大于NGS-MRD。因?yàn)榱魇郊?xì)胞術(shù)適用于所有患者，而NGS-MRD產(chǎn)品受限于技術(shù)原因，目前只能適用于92%左右的患者。

而在實(shí)體瘤領(lǐng)域，流式細(xì)胞術(shù)卻沒有用武之地。這是因?yàn)椋瑢?shí)體瘤MRD檢測(cè)的原理和血液瘤完全不同。

在實(shí)體瘤早期，腫瘤細(xì)胞的含量非常少，要通過細(xì)胞篩選并不現(xiàn)實(shí)。目前，主流的手段是通過檢測(cè)血液中的ctDNA來(lái)判斷，所以只能用NGS-MRD。

與流式細(xì)胞術(shù)相比，NGS-MRD在血液瘤領(lǐng)域的可及性較低，但其更廣闊的想象空間在于實(shí)體瘤。據(jù)我國(guó)癌癥等級(jí)中心數(shù)據(jù)，2019年國(guó)內(nèi)癌癥新增病例約440萬(wàn)名，其中約20萬(wàn)名為血液腫瘤，占整體癌癥發(fā)病率的4.5%。

這可能也是泛生子等國(guó)內(nèi)玩家押注NGS-MRD的核心所在。

4、樣本要求

由于檢測(cè)方法的不同，這兩大技術(shù)對(duì)樣本的要求也有所不同。從對(duì)樣本要求來(lái)看，NGS-MRD占有一定優(yōu)勢(shì)。原因在于，NGS-MRD對(duì)樣本的要求相對(duì)更低。

由于需要保證細(xì)胞的活性、得率等，流式細(xì)胞術(shù)對(duì)樣本的要求極高，只能是新鮮的樣本。即便經(jīng)過短時(shí)間冷凍，都會(huì)受到影響，最終導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果失真。

因此，采用流式細(xì)胞術(shù)的骨髓樣本，從采集到檢測(cè)不能超過36個(gè)小時(shí)，這對(duì)機(jī)構(gòu)的運(yùn)營(yíng)能力提出了較高的要求。另外，樣本細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量，也會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成較大偏差。因此，各個(gè)環(huán)節(jié)的操作，都需要非常謹(jǐn)慎、細(xì)致。

而NGS-MRD對(duì)樣本細(xì)胞的活性沒有太高要求，所以不必是新鮮樣本，只要是規(guī)定時(shí)間內(nèi)存儲(chǔ)的樣本即可；操作過程中的影響因素也相對(duì)較少，結(jié)果可靠性更高。

5、成本

MRD檢測(cè)產(chǎn)品的成本分為兩個(gè)維度，一個(gè)是患者支付成本，一個(gè)是時(shí)間成本。

首先來(lái)看支付成本。目前NGS-MRD的各項(xiàng)成本都更高，這導(dǎo)致其最終售價(jià)會(huì)高于其它檢測(cè)品類。所以，流式細(xì)胞術(shù)在這方面會(huì)相對(duì)更有優(yōu)勢(shì)一些。

不過，基因檢測(cè)當(dāng)前依然遵循摩爾定律，隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步，以及應(yīng)用場(chǎng)景的拓寬，NGS-MRD檢測(cè)產(chǎn)品的成本會(huì)持續(xù)下降，未來(lái)終端售價(jià)也可能持續(xù)走低。

在2022首屆血液腫瘤MRD高峰論壇上，華中科技大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院孫春艷教授便表示，基于NGS-MRD的敏感度等諸多優(yōu)勢(shì)，未來(lái)隨著價(jià)格的持續(xù)下降，將會(huì)更有前景。

再來(lái)看時(shí)間成本。因?yàn)闄z測(cè)原理的不同，使得流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)產(chǎn)品所需時(shí)間較短，最快數(shù)小時(shí)內(nèi)就可以完成，通常一天內(nèi)就能出結(jié)果。

而NGS-MRD檢測(cè)產(chǎn)品由于檢測(cè)流程復(fù)雜，通常需要1-2周左右的時(shí)間。對(duì)于不同治療階段的患者，需要的報(bào)告時(shí)間不同。某種程度上來(lái)說，這也會(huì)影響NGS-MRD產(chǎn)品的使用。

6、總結(jié)

一個(gè)具有更高臨床意義的產(chǎn)品組合，對(duì)患者才是最有意義的。基于此，不同技術(shù)之間，不是互相替代，而是相互補(bǔ)充。

雖然在多個(gè)維度，流式細(xì)胞術(shù)和二代測(cè)序產(chǎn)品有著顯著差異，但這二者之間也并非是誰(shuí)能取代誰(shuí)的關(guān)系。因?yàn)椴煌颊?、不同階段，可以應(yīng)用的產(chǎn)品不同。

從醫(yī)生角度出發(fā)，更可能傾向通過“組合拳”的方式，給患者帶來(lái)效果更好、性價(jià)比更高的診療方案。

技術(shù)最終要服務(wù)于臨床需求。MRD技術(shù)也不例外，核心在于需要有更好的產(chǎn)品、更好的技術(shù)得到應(yīng)用，只有這樣，醫(yī)生才能擁有更有力的武器，讓越來(lái)越多的患者不再生存在癌癥復(fù)發(fā)的陰影下。