易文賽發(fā)表探索臍帶干細(xì)胞來源外泌體在急性肺損傷治療中的作用

近日，易文賽研究院藥物研發(fā)團隊在期刊《Journal of Cellular Biochemistry》發(fā)表研究論文“Umbilical cord MSC‐derived exosomes improve alveolarmacrophage function and reduce LPS‐induced acute lung injury”，論文聚焦分析臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSC)來源的外泌體（Exosomes）在脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷模型中的治療作用及其機制，探索其臨床轉(zhuǎn)化潛力。

急性肺損傷(ALI) 是一種可經(jīng)多種感染因素如細(xì)菌、病毒感染和非感染性因素如吸入毒性氣體、大量輸血、藥物中毒、急性胰腺炎等引起的肺部肺泡上皮細(xì)胞和毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的呼吸系統(tǒng)重癥。這種損傷導(dǎo)致肺血管通透性增加，進而引起彌漫性肺間質(zhì)和肺泡水腫。如果不及時治療，ALI可發(fā)展為更嚴(yán)重的急性呼吸窘迫綜合征 (ARDS)。目前，尚無具體的ALI/ARDS藥物治療方案，最常通過氧療、機械通氣和控制肺部炎癥和液體積聚的藥物緩解患者癥狀。

現(xiàn)已有大量臨床研究探討利用間充質(zhì)干細(xì)胞作為COVID‐19引起的肺損傷的潛在治療方法。間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells，MSCs) 作為 ALI和其他肺病的可能治療方法，在臨床前和臨床研究中顯示了極具前景的治療效果。

易文賽研發(fā)團隊通過分析UCMSC來源Exosomes在脂多糖 (LPS)誘導(dǎo)的ALI模型中的作用機制，發(fā)現(xiàn)UCMSC來源的Exosomes（UCMSC-EXO）可有效改善肺泡巨噬細(xì)胞的代謝功能，并促進其向抗炎表型的轉(zhuǎn)變，最終改善ALI。

研究結(jié)果顯示，UCMSC-EXO治療可顯著抑制ALI小鼠內(nèi)皮和上皮通透性增加(p<0.05)，肺損傷顯著下降，具體表現(xiàn)為炎性細(xì)胞浸潤減少、肺泡壁變??；而干細(xì)胞做3D微球培養(yǎng)后得到的外泌體對肺損傷的修復(fù)能力更強（圖2C，D）。同時，兩個外泌體處理組也顯著抑制了肺濕/干比值（圖2E），并表現(xiàn)為與肺損傷評分降低、炎性細(xì)胞浸潤減少、支氣管肺泡灌洗液 (BALF)中的蛋白滲漏減少（圖2F）。此外，外泌體處理顯著降低炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL‐6和腫瘤壞死因子(TNF)‐α的表達，而IL‐10水平升高（圖2G）。

進一步RNA-seq分析結(jié)果表明，各組間顯著差異表達基因（DEGs）從生物學(xué)過程角度看，主要富集在生物粘附、細(xì)胞過程和生物調(diào)控中；從分子功能角度看，DEGs主要富集在結(jié)合和催化活性上；STRING 分析表明，這些蛋白富集在 RNA 結(jié)合、結(jié)構(gòu)分子活性、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和氧化磷酸化中（圖4C）。此外，研究得到12個顯著DEGs：Larp7、Gm11711、Coch、Kntc1、Cd300lh、Fga、Pcdha1、Cyp2e1、Fgf14、Krt1、Zbtb16、Mrpl53（圖4D），均被證實與巨噬細(xì)胞極化相關(guān)。

（*巨噬細(xì)胞極化：當(dāng)機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)遭到破壞時，巨噬細(xì)胞通過吞噬、釋放炎癥因子等作用清除外源微生物，以恢復(fù)機體動態(tài)平衡，這個過程稱為活化。伴隨著活化，在細(xì)胞因子的作用下，巨噬細(xì)胞改變其表型，以增強應(yīng)對微環(huán)境變化的能力，這個過程即為巨噬細(xì)胞的極化。巨噬細(xì)胞極化就是指成熟巨噬細(xì)胞在特殊微環(huán)境刺激下，產(chǎn)生不同功能表型的過程。巨噬細(xì)胞的極化對防御病原體、調(diào)節(jié)炎癥、修復(fù)組織和維持體內(nèi)平衡的穩(wěn)定有著十分重要的作用。）

進一步研究顯示UCMSC-EXO能夠在體外條件下更好地保護巨噬細(xì)胞：UCMSC-EXO能夠降低巨噬細(xì)胞凋亡水平，提高線粒體膜電位，促進ATP生成，并降低ROS水平,且3D培養(yǎng)UCMSC所得外泌體效果更為顯著,上述結(jié)果可能是通過調(diào)控巨噬細(xì)胞能量代謝實現(xiàn)的（圖5）。

綜上，研究數(shù)據(jù)充分證明了UCMSC來源的外泌體在嚴(yán)重肺部炎癥進程中的抗炎和組織保護作用，3D培養(yǎng)UCMSC EXO給藥效果更為明顯。盡管利用MSC來源的外泌體進行疾病治療的研究仍處于早期階段，還需要更多研究來了解其潛在優(yōu)勢與作用機制。不可否認(rèn)，其已成為干細(xì)胞研究領(lǐng)域的新熱點，在未來疾病治療和組織修復(fù)應(yīng)用中極具潛力。